Kingella Kingae

ΑΙΤΙΑ

Η Kingella Kingea είναι ένας Gram (-) μικροοργανισμός που ανήκει στην οικογένεια Neisseria . Είναι ένας απαιτητικός , δυνητικά αναερόβιος , β-αιμολυτικός , μικρός βάκιλλος, ο οποίος εμφανίζεται σε ζεύγη ή σε μικρές αλυσίδες με αποστρογγυλωμένα άκρα & ο οποίος αντιστέκεται στον αποχρωματισμό, οδηγώντας στον χαρακτηρισμό του ως , λανθασμένα, gram (+) μικροοργανισμού.

ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΒΑΚΤΗΡΙΟΥ

Τα K kingae αναπτύσσονται σε άγαρ σόγιας τρυπτικάσης με προσθήκη αιμοσφαιρίνης (άγαρ αίματος) και άγαρ σοκολάτας, αλλά δεν αναπτύσσονται σε μέσα MacConkey ή Krigler. Ένα επιλεκτικό μέσο που αποτελείται από άγαρ αίματος με 2 g/mL προσθήκης βανκομυκίνης έχει αναπτυχθεί για να αναστέλλει την ανάπτυξη ανταγωνιστικής χλωρίδας και να διευκολύνει την αναγνώριση των K kingae σε αναπνευστικά δείγματα.

Ένα περιβάλλον εμπλουτισμένο με CO2 ενισχύει την ανάπτυξη, αλλά μόνο ένα μικρό ποσοστό στελεχών είναι πραγματικά καπνόφιλα (απαιτείται CO2 για την ανάπτυξή τους).

Η K kingae είναι μη κινητή, θετική στην οξειδάση και εμφανίζει αρνητικές αντιδράσεις καταλάσης, ουρεάσης και ινδόλης. Παράγει οξύ από γλυκόζη και μαλτόζη, αλλά όχι από άλλα σάκχαρα, υδρολύει το ινδοξυλοφωσφορικό και το L-προλυλ- ναφθυλαμίδιο και εμφανίζει θετικές αντιδράσεις αλκαλικής και όξινης φωσφατάσης.

Οι αποικίες της K kingae παράγουν έντονα αποτυπώματα στην επιφάνεια του άγαρ, τα οποία γίνονται ορατά μετά την αφαίρεση των αποικιών. Μετά από λίγες ημέρες επώασης, οι αποικίες περιβάλλονται από περιφερειακές ζώνες εξάπλωσης (εξάπλωση-διαβρωτική ανάπτυξη). Οι παραλλαγές αποικιών που εμφανίζουν ομαλή ανάπτυξη μπορούν επίσης να ανακτηθούν, επομένως οι παλιές καλλιέργειες εμφανίζουν μια έντονα πολυμορφική εικόνα. Η διασκορπιζόμενη ανάπτυξη σχετίζεται με την παρουσία μακριών ινιδίων τύπου 4, ενώ οι οργανισμοί που εμφανίζουν την ομαλή παραλλαγή αποικίας δεν έχουν ανάλογα ινίδια. Η ικανότητα εμφανισης διασκορπιζόμενης ανάπτυξης συχνά χάνεται μετά από επαναλαμβανόμενη υποκαλλιέργεια σε αερόβιες συνθήκες και αυτή η αλλαγή είναι μη αναστρέψιμη. 

Ανίχνευση καλλιέργειας της K kingae

Ανιχνεύεται σε αερόβια φιαλίδια καλλιέργειας αίματος BACTEC  σε όλες τις περιπτώσεις μετά από διάμεση επώαση 4 ημερών. Όταν τα θετικά φιαλίδια καλλιέργειας αίματος υποκαλλιεργηθούν σε πλάκες αιματούχου αγαρ ή σοκολατούχου άγαρ, η K kingae αναπτύσσεται χωρίς δυσκολία, δείχνοντας ότι τα συνήθη στερεά μέσα είναι σε θέση να υποστηρίξουν τις διατροφικές της ανάγκες. Υποτίθεται ότι το πύον ασκεί ανασταλτική επίδραση στα K kingae και η αραίωση των εκκρίσεων σε μεγάλο όγκο ζωμού μειώνει τη συγκέντρωση των επιβλαβών παραγόντων, βελτιώνοντας την ανάρρωση του οργανισμού.

Τα K kingae έχουν επίσης απομονωθεί με επιτυχία από το αίμα και τα εκκρίματα με εμβολιασμό φιαλιδίων BacT/Alert , Hemoline DUO και Isolator 1·5 Microbial Tube .

Ανίχνευση K kingae με ενίσχυση νουκλεϊκού οξέος

Λόγω της σημασίας της ταχείας ανίχνευσης της λοίμωξης σε φυσιολογικά στείρες θέσεις του σώματος και των δυσκολιών στην ανίχνευση των K kingae σε καλλιέργειες, ο οργανισμός φαίνεται να είναι ένας φυσικός υποψήφιος για ανίχνευση με τεχνική ενίσχυσης νουκλεϊκών οξέων.

Φαίνεται ότι  η ανάκτηση των K kingae με μεθόδους καλλιέργειας παραμένει μη βέλτιστη και ο οργανισμός είναι πιθανώς υπεύθυνος για ένα σημαντικό ποσοστό περιπτώσεων αρνητικής σε καλλιέργεια αρθρίτιδας.

ΕΠΙΔΗΜΙΟΛΟΓΙΑ

Η συχνότερη κατοικία της Kingella Kingae είναι ο οπίσθιος φάρυγγας του ανθρώπου. Ο μικροοργανισμός αποικίζει μικρά παιδιά πιο συχνά απ ότι μεγαλύτερα παιδιά ή ενήλικες και μπορεί να μεταδίδεται μεταξύ των παιδιών στους παιδικούς σταθμούς, προκαλώντας περιστασιακά ομάδες περιστατικών. Η λοίμωξη μπορεί να σχετίζεται με προηγούμενη ή ταυτόχρονη στοματίτιδα ή λοίμωξη του ανώτερου αναπνευστικού συστήματος

Οι ιοι που παρατηρούνται συνήθως πριν ή κατά τη διάρκεια της λοίμωξης από την Kingella Kingae είναι οι εξής : ανθρώπειος ρινοιός, εντεροιοί, HSV / HSV στοματίτιδα, VZV/ανεμευλογιά, κορωναιός, παραινφλουέντζα, αδενοιοί, γρίππη , EBV .

ΠΕΡΙΟΔΟΣ ΕΠΩΑΣΗΣ

Ποικίλει

Κατανομή ηλικίας και συχνότητα εμφάνισης διεισδυτικής νόσου

Σχεδόν το 90% όλων των ασθενών με διεισδυτικές λοιμώξεις από K kingae που αναφέρονται στην ιατρική βιβλιογραφία ήταν παιδιά κάτω των 5 ετών και πάνω από το 60% των επεισοδίων έχουν συμβεί κάτω των 2 ετών.83 ασθενείς (97,6%) ήταν παιδιά κάτω των 48 μηνών, ένα παιδί ήταν 66 μηνών και ο υπόλοιπος ασθενής ήταν ενήλικας 21 ετών. Η διάμεση ηλικία των παιδιών ήταν 14 μήνες (εύρος 4–66) και μέση ηλικία 16,1 μήνες (SD 9,7).

83 ασθενείς (97,6%) ήταν παιδιά κάτω των 48 μηνών, ένα παιδί ήταν 66 μηνών και ο υπόλοιπος ασθενής ήταν ενήλικας 21 ετών. Η διάμεση ηλικία των παιδιών ήταν 14 μήνες (εύρος 4–66) και μέση ηλικία 16,1 μήνες (SD 9,7).

Η υπολογιζόμενη ετήσια επίπτωση είναι 20,8/100.000, 23,9/100.000, 5,7/100.000 και 1,9/100.000 για παιδιά ηλικίας 0–11, 12–23, 24–35 και 36–47 μηνών, αντίστοιχα. Η συχνότητα εμφάνισης σε παιδιά κάτω των 6 μηνών ήταν μόνο 1,3/100.000 και κορυφώθηκε στα 40,3/100.000 στην ομάδα των 6-11 μηνών.

Κατανομή κατά φύλο

Επικρατούν οι άρρενες, η δε εξήγηση για αυτήν την μη ισορροπημένη κατανομή κατά φύλο δεν είναι προφανής, αν και έχουν περιγραφεί αυξημένες αναλογίες ανδρών προς γυναίκες με παθογόνα όπως το S pneumoniae και το N meningitidis.

Εποχική κατανομή

Γενικά η εποχική επικράτηση του οργανισμού στην αναπνευστική οδό δεν συμπίπτει με αυτήν της διεισδυτικής λοίμωξης. Ένα υψηλότερο ποσοστό προσβολής διηθητικών λοιμώξεων κατά τους ψυχρότερους μήνες του έτους, το οποίο συμβαίνει και με άλλα αναπνευστικά παθογόνα, φαίνεται να προκύπτει από την αλληλεπίδραση της φαρυγγικής μεταφοράς με πρόσθετους παράγοντες, πιθανώς εποχιακές ιογενείς λοιμώξεις.

ΠΑΘΟΓΕΝΕΣΗ

Μηχανισμός της λοίμωξης

Παρόλο που η τρέχουσα γνώση της παθογένεσης της  διεισδυτικής K kingae είναι ελλιπής, τα διαθέσιμα στοιχεία υποδηλώνουν αλληλεπίδραση με ιογενείς λοιμώξεις. Ταυτόχρονη στοματίτιδα, συμπεριλαμβανομένων ελκών στοματικής κοιλότητας που προκαλούνται από ανεμοβλογιά, και συμπτώματα λοίμωξης του ανώτερου αναπνευστικού συστήματος έχουν συχνά βρεθεί σε προσβεβλημένους ασθενείς. Σε μια προοπτική μελέτη στην οποία αξιολογήθηκε η θεραπεία με ακυκλοβίρη για πρωτοπαθή ερπητική ουλοστοματίτιδα, η K kingae απομονώθηκε από το αίμα σε τέσσερα από τα 29 (13,8%) προσβεβλημένα παιδιά. Φαίνεται ότι οι οργανισμοί K kingae που αποικίζουν το στοματοφάρυγγα διεισδύουν στο βλεννογόνο που έχει ήδη υποστεί βλάβη από μια ιογενή νόσο. Ο οργανισμός μπορεί στη συνέχεια να προχωρήσει σε όλους τους αεραγωγούς προκαλώντας λοίμωξη του κατώτερου αναπνευστικού συστήματος ή/και να εισβάλει στην κυκλοφορία του αίματος. Μπορεί να ακολουθήσει παροδική καλοήθης βακτηριαιμία ή ο οργανισμός μπορεί να εισχωρήσει στο ενδοκάρδιο, στον αρθρικό χώρο, στα οστά ή στους μεσοσπονδύλιους δίσκους, με αποτέλεσμα μια εστιακή  λοίμωξη

Ανοσολογική απόκριση

Τα υψηλά ποσοστά μεταφοράς και λοίμωξης από K kingae που παρατηρήθηκαν στα πρώτα 2 χρόνια ζωής ακολουθήθηκαν από απότομη πτώση στα μεγαλύτερα παιδιά. Η σπανιότητα των κρουσμάτων μεταξύ των ενηλίκων και η εμφάνιση νόσου σε ανοσοκατεσταλμένους ασθενείς, υποδηλώνουν ότι μια επίκτητη ανοσολογική απόκριση είναι απαραίτητη για την προστασία από τον αποικισμό και τη λοίμωξη. 

Τα αποτελέσματα μιας έρευνας που διεξήχθη σε 19 παιδιά με λοιμώξεις από K kingae στην κυκλοφορία του αίματος και οστεοαρθρικές λοιμώξεις έδειξαν στατιστικά σημαντική αύξηση στα επίπεδα IgG, όπως μετρήθηκαν με δοκιμασία ELISA στη φάση ανάρρωσης, δείχνοντας μια ανοσολογική απόκριση. Το αυξημένο επίπεδο αντισωμάτων στο ομόλογο (μολυσματικό) απομονωμένο στέλεχος σε σύγκριση με αυτό που μετρήθηκε έναντι ενός ετερόλογου στελέχους, υποδηλώνει επαγωγή μιας πιο αποτελεσματικής ανοσολογικής απόκρισης στο λοιμογόνο στέλεχος. Τα επίπεδα των αντισωμάτων IgA στον ορό έτειναν να μειώνονται μεταξύ της οξείας και της φάσης ανάρρωσης της νόσου, δείχνοντας ότι η ανοσολογική απόκριση αυτού του τύπου αντισώματος είναι παροδική και βραχύβια. Για να μελετηθεί η δυναμική των επιπέδων αντισωμάτων στην παιδική ηλικία, ελήφθησαν δείγματα ορού από παιδιά σε διαφορετικές ηλικίες. Το μέσο επίπεδο IgG ήταν υψηλό στους 2 μήνες, σταδιακά μειώθηκε στη συνέχεια φτάνοντας στο χαμηλότερο επίπεδο στους 6-7 μήνες, παρέμεινε χαμηλό μέχρι την ηλικία των 18 μηνών και αυξήθηκε σε παιδιά ηλικίας 24 μηνών. 

Τα επίπεδα IgA στον ορό ήταν χαμηλότερα στους 2 μήνες και αυξήθηκαν αργά μεταξύ των ηλικιών 4 και 7 μηνών. Περαιτέρω αύξηση και των δύο τύπων αντισωμάτων παρατηρήθηκε σε παιδιά ηλικίας 24 μηνών και άνω.

Για να διερευνηθεί η πιθανότητα η αναπνευστική μεταφορά του K kingae να προκαλεί ανοσοαπόκριση, μελετήθηκε ένα μόνο δείγμα ορού που ελήφθη από 15 ασυμπτωματικούς φορείς του οργανισμού, οι οποίοι ήταν αποδεδειγμένοι σε καλλιέργεια. Τα επίπεδα αντισωμάτων ήταν στο ανώτερο εύρος αυτών που παρατηρήθηκαν στον γενικό πληθυσμό παιδιών της ίδιας ηλικίας.

Τα αποτελέσματα αυτών των μελετών διευκρινίζουν τον ρόλο που διαδραματίζει η έμφυτη και η επίκτητη ανοσία στη δυναμική της μεταφοράς του K kingae και της εμφάνισης λοίμωξης κατά την παιδική ηλικία.

Η χαμηλή συχνότητα αναπνευστικής μεταφοράς και τα ποσοστά διεισδυτικής λοίμωξης στους πρώτους 6 μήνες της ζωής, σε συνδυασμό με την μη ανιχνεύσιμη IgA στον ορό και τα υψηλά επίπεδα IgG, δείχνουν ότι η προστασία παρέχεται από την ανοσία που προέρχεται από τη μητέρα. Η υψηλή επικράτηση του οργανισμού στον φάρυγγα και το αυξημένο ποσοστό προσβολής από διεισδυτική λοίμωξη σε παιδιά ηλικίας 6-24 μηνών συμπίπτουν με την ηλικιακή ομάδα που έχει τα χαμηλότερα επίπεδα αντισωμάτων. Το χαμηλό ποσοστό μεταφοράς, η μειωμένη συχνότητα εμφάνισης της νόσου και τα αυξανόμενα επίπεδα αντισωμάτων που βρίσκονται σε μεγαλύτερα παιδιά πιθανώς αντιπροσωπεύουν μια συσσωρευτική εμπειρία με τα αντιγόνα K kingae μέσω του αναπνευστικού αποικισμού.

ΠΑΘΟΓΕΝΕΤΙΚΟΣ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΣ & ΛΟΙΜΟΓΟΝΟΙ ΠΑΡΑΓΟΝΤΕΣ

Προσκόλληση στο Αναπνευστικό Επιθήλιο του Ξενιστή

Ινίδια Τύπου IV

Η πρώιμη μορφολογική εξέταση του K. kingae αποκάλυψε την παρουσία μακρών επιφανειακών ινών. Οι Kehl-Fie et al. απέδειξαν ότι αυτές οι ίνες ήταν ινίδια τύπου IV και ότι η παρουσία των ινών στην βακτηριακή επιφάνεια ήταν απαραίτητη για την υψηλού επιπέδου προσκόλληση σε πολλαπλούς κυτταρικούς τύπους, συμπεριλαμβανομένων των επιθηλιακών κυττάρων και των αρθρικών κυττάρων. Περαιτέρω εξέταση κλινικών απομονωμένων στελεχών του K. kingae αποκάλυψε ότι η ινιδιογένεση σε αυτό το είδος είναι εξαιρετικά μεταβλητή και συσχετίζεται με τη μορφολογία των αποικιών. Τα στελέχη που εκφράζουν υψηλά επίπεδα ινιδίων τύπου IV παράγουν έναν τύπο αποικίας που εξαπλώνεται/διαβρώνεται, τα στελέχη που εκφράζουν χαμηλά επίπεδα  ινιδίων τύπου IV παράγουν έναν τύπο αποικίας που δεν εξαπλώνεται/δεν διαβρώνεται, και τα στελέχη που δεν εκφράζουν ινίδια τύπου IV παράγουν ένα θόλωτό τύπο αποικίας χωρίς κροσσούς. Σε αυτή τη συλλογή κλινικών απομονωμένων στελεχών, η παρουσία ινιδίων τύπου IV, ανεξάρτητα από το επίπεδο ινιδιογένεσης, συσχετίστηκε με την προσκόλληση των ανθρώπινων επιθηλιακών κυττάρων. Η έκφραση της πρωτοταγούς δομικής πρωτεΐνης που συνθέτει την ίνα τύπου IV του ινιδίου (κύρια πιλίνη, PilA1) βρέθηκε ότι ρυθμίζεται από το ρυθμιστικό σύστημα δύο συστατικών PilS/PilR και τον εναλλακτικό παράγοντα σ, σ54 . Στο πρωτότυπο στέλεχος 269–492, η μετάλλαξη της pilR είχε ως αποτέλεσμα την απώλεια του ινιδίου, ενώ η μετάλλαξη της pilS είχε ως αποτέλεσμα την ελάττωση του ινιδίου, υποδηλώνοντας ότι ο ρυθμιστής απόκρισης PilR διατηρεί ένα βασικό επίπεδο δυναμικού ενεργοποίησης μεταγραφής της pilA1 απουσία της σήματοδοτικής κινάσης PilS.

Δύο πρωτεΐνες που σχετίζονται με το ινίδιο, οι οποίες ονομάζονται PilC1 και PilC2, βρέθηκαν κρίσιμες για λειτουργίες που προκαλούνται από το ινίδιο τύπου IV. Η έκφραση της PilC1 ή της PilC2 μόνη της αποδείχθηκε απαραίτητη για το επιφανειακό ινίδιο και για τον φαινότυπο προσκόλλησης του κυττάρου ξενιστή. Τα μεταλλαγματα που δεν έχουν τόσο PilC1 όσο και PilC2 δεν προσκολλώνται και έχουν σοβαρό ελάττωμα στο επίπεδο επιφανειακού ινιδίου. Τα μέλη της οικογένειας πρωτεϊνών PilC σε άλλα βακτήρια αποδείχθηκαν πολυλειτουργικά, παίζοντας κρίσιμους ρόλους στη βιογένεση και την προσκόλληση του ινιδίου τύπου IV. Είναι ενδιαφέρον ότι οι PilC1 και PilC2 παρουσιάζουν μεγάλη απόκλιση στην αλληλουχία τους, μοιράζοντας μόνο 7% ταυτοποίηση και 16% ομοιότητα συνολικά. Η εξέταση των αλληλουχιών αμινοξέων τους αποκάλυψε μια προβλεπόμενη θέση δέσμευσης ασβεστίου (δέσμευσης Ca) 9 αμινοξέων στην περιοχή C-τελικού άκρου της PilC1 και μια θέση δέσμευσης Ca 12 αμινοξέων στην περιοχή C-τελικού άκρου της PilC2. Σε αντίθεση με ό,τι παρατηρήθηκε για την πρωτεΐνη που μοιάζει με PilC στην Pseudomonas aeruginosa (που ονομάζεται PilY1), η εξάλειψη της δέσμευσης Ca στις PilC1 και PilC2 μέσω μιας προσέγγισης μεταλλαξιογένεσης δεν είχε καμία επίδραση στην επιφανειακή ινιδιογένεση. Ωστόσο, η δέσμευση Ca από τη PilC1 θέση αποδείχθηκε απαραίτητη για την προσκόλληση που προκαλείται από το ινίδιο τύπου IV και για μια μορφή επιφανειακής κινητικότητας που προκαλείται από το ινίδιο τύπου IV, η οποία ονομάζεται τρεμοπαίζουσα κινητικότητα, ενώ η εξάλειψη της δέσμευσης Ca στην PilC2 είχε μόνο μέτρια επίδραση στην τρεμοπαίζουσα κινητικότητα και καμία επίδραση στην προσκόλληση.

Δεδομένου ότι η έκφραση τουλάχιστον μίας πρωτεΐνης PilC είναι απαραίτητη τόσο για τη βιογένεση του ινιδίου τύπου IV όσο και για την προσκόλληση που προκαλείται από το ινίδιο τύπου IV, διερευνήθηκε η υπόθεση ότι και οι δύο πρωτεΐνες είναι παράγοντες βιογένεσης του ινιδίου καθώς και άμεσες προσκολλητίνες. Οι ανασυνδυασμένες PilC1 και PilC2 εκφράστηκαν, καθαρίστηκαν και εξετάστηκαν σε δοκιμασίες σύνδεσης με ανθρώπινα επιθηλιακά κύτταρα. Και οι δύο πρωτεΐνες αποδείχθηκε ότι συνδέονται με τα κύτταρα με συγκεκριμένο τρόπο και η δραστικότητα σύνδεσης εντοπίστηκε στην περιοχή Ν-τελικού άκρου των πρωτεϊνών. Είναι ενδιαφέρον ότι η έκφραση κολοβωμένων θραυσμάτων PilC1 ή PilC2 στο K. kingae (απουσία της άλλης πρωτεΐνης PilC) αποκάλυψε ότι η περιοχή C-τελικού άκρου κάθε πρωτεΐνης ήταν ικανή να προάγει τη βιογένεση του ινιδίου αλλά όχι την προσκόλληση. Αυτά τα ευρήματα αναγνώρισαν τις πρωτεΐνες PilC1 και PilC2 του K. kingae ως πολυλειτουργικές πρωτεΐνες που εμπλέκονται σε μια ποικιλία φαινοτύπων τύπου IV που προκαλούνται από το ινίδιο.

Ομόλογο NhhA της Kingella (Knh)

Η βιοπληροφορική ανάλυση του γονιδιώματος του K. kingae με στόχο την αναγνώριση πιθανών επιφανειακών τοπικών προσκολλητικών πρωτεϊνών αποκάλυψε ένα μεγάλο ανοιχτό πλαίσιο ανάγνωσης (ORF) με ομολογία αλληλουχίας με την τριμερή αυτομεταφορέα NhhA του Neisseria meningitidis και ονομάστηκε ομόλογο NhhA της Kingella (Knh). Η προβλεπόμενη περιοχή β-βαρελιού του C-τελικού άκρου αποδείχθηκε ότι τριμερίζεται, επιβεβαιώνοντας ότι το Knh είναι ένας τριμερής αυτομεταφορέας. Η διαγραφή της knh οδήγησε σε μείωση ~50% στην προσκόλληση του K. kingae στα επιθηλιακά κύτταρα.

Περαιτέρω ανάλυση αποκάλυψε ότι η προσκολλητική δράση της Knh εξαρτιόταν από την μετα-μεταφραστική προσθήκη υπολειμμάτων γλυκόζης από μια μη συμβατική Ν-συνδετική γλυκοζυλτρανσφεράση. Η εξέταση της προσκόλλησης που προκαλείται από την K. kingae τύπου IV έναντι της προσκόλλησης που προκαλείται από την Knh υπό συνθήκες δυναμικής ροής αποκάλυψε ότι η Knh προκαλεί ισχυρότερη προσκόλληση από τα ινίδια τύπου IV.

Μηχανισμός Προσκόλλησης

Σημειώθηκε ότι τα στελέχη K. kingae που δεν έχουν ινίδια τύπου IV αλλά εξακολουθούν να εκφράζουν Knh είναι μη προσκολλητικά, γεγονός που υποδηλώνει ότι υπάρχει ένας άλλος επιφανειακός παράγοντας που εμποδίζει την προσκόλληση που προκαλείται από την Knh και ότι τα ινίδια  τύπου IV είναι απαραίτητα για την υπερνίκηση του ανασταλτικού παράγοντα της Knh. Κατά την εξέταση πιθανών παραγόντων που θα μπορούσαν να αναστείλουν την προσκόλληση που προκαλείται από Knh, διερευνήθηκε η παρουσία ενός πολυσακχαρίτη της κάψας. Χρησιμοποιώντας έναν συνδυασμό γονιδιωματικών αναλύσεων, ήπιας όξινης επιφανειακής επεξεργασίας σε συνδυασμό με χρώση με μπλε της Αλσίας και ηλεκτρονική μικροσκοπία μετάδοσης λεπτής τομής (TEM) με χρώση κατιονικής φερριτίνης, αποδείχθηκε ότι το K. kingae αναπτύσσει μια κάψα πολυσακχαρίτη στην επιφάνειά της.

Η απομάκρυνση της κάψας από την επιφάνεια του βακτηρίου μέσω της διαταραχής του οπερονίου εξαγωγής κάψουλας ctrABCD αποκατέστησε την προσκόλληση που προκαλείται από Knh σε ένα μη ινιδικό υπόβαθρο μετάλλαξης pilA1, αποδεικνύοντας ότι η κάψα είναι υπεύθυνη για την κάλυψη της προσκολλητικής δραστηριότητας Knh. Αποδείχθηκε περαιτέρω ότι σε έναν οργανισμό άγριου τύπου, τα ινίδια τύπου IV είναι σε θέση να ξεπεράσουν την ανασταλτική επίδραση της κάψας στην προσκόλληση που προκαλείται από Knh μέσω της συστολής του ινιδίου που προκαλείται από PilT. Καθώς η Knh είναι μια επιφανειακή πρωτεΐνη και είναι πιθανώς ανοσογόνος, είναι πιθανό η κάψα να παίζει ρόλο στην ανοσολογική αποφυγή καλύπτοντας την Knh και αποτρέποντας τη δέσμευση αντισωμάτων.

Αυτά τα δεδομένα επέτρεψαν τον σχηματισμό ενός μοντέλου προσκόλλησης του K. kingae στα επιθηλιακά κύτταρα του ξενιστή, το οποίο περιλαμβάνει μια διαδικασία τριών σταδίων: 

(1) τα ινίδια τύπου IV δημιουργούν μια αρχική αλληλεπίδραση με το κύτταρο ξενιστή, 

(2) τα προσκολλημένα ινίδια συστέλλονται, τραβώντας το βακτήριο σε στενή επαφή με το κύτταρο ξενιστή, προκαλώντας μετατόπιση του πολυσακχαρίτη της κάψας, και 

(3) η μετατοπισμένη κάψα επιτρέπει στην Knh να έχει πρόσβαση στον υποδοχέα του κυττάρου ξενιστή για να μεσολαβήσει στην προσκόλληση πλήρους επιπέδου. 

Αυτό το μοντέλο υποστηρίζεται από πρόσθετα στοιχεία που δείχνουν ότι η κάψα στην επιφάνεια της K. kingae εκτείνεται πέρα ​​από το μήκος της Knh και ότι τα βακτήρια αλληλεπιδρούν πιο στενά με τα κύτταρα ξενιστή όταν τα ινίδια τύπου IV είναι ικανά να συστέλλονται.

Παραβίαση του Αναπνευστικού Επιθηλιακού Φραγμού

Τοξίνη RTX

Μόλις η K. kingae αποικίσει το αναπνευστικό επιθήλιο του στοματοφάρυγγα, πρέπει στη συνέχεια να παραβιάσει τον επιθηλιακό φραγμο και να εισέλθει στην κυκλοφορία του αίματος για να διαδοθεί. Σε πρώιμες μελέτες αλληλεπιδράσεων in vitro μεταξύ της K. kingae και των κυττάρων ξενιστή, παρατηρήθηκε ότι οι μονοστοιβάδες των κυττάρων διαταράσσονταν ταχέως, με αποτέλεσμα την κυτταρική ανύψωση (αποκόλληση) και τον κυτταρικό θάνατο. Χρησιμοποιώντας μια διαλογή μεταλλαξιογένεσης τρανσποζονίων, αποδείχθηκε ότι το K. kingae παράγει μια ευρέως δραστική κυτοτοξίνη που ονομάζεται RtxA και ανήκει στην οικογένεια επαναλήψεων στην τοξίνη (RTX). Η τοξίνη εμφανίζει αιμόλυση έναντι των ερυθροκυττάρων και είναι κυτταροτοξική στα επιθηλιακά κύτταρα, τα αρθρικά κύτταρα, τους ινοβλάστες, τους οστεοβλάστες και ιδιαίτερα τα λευκοκύτταρα. Σε ένα μοντέλο νεαρού αρουραίου με διεισδυτική νόσο K. kingae, η τοξίνη RtxA αποδείχθηκε κρίσιμη για την ικανότητα των βακτηρίων να προκαλούν νοσηρότητα και θνησιμότητα, υπογραμμίζοντας τον σημαντικό ρόλο της σε ένα σύστημα in vivo που περιλαμβάνει εισβολή στην κυκλοφορία του αίματος. Αξίζει να σημειωθεί ότι παρατηρήθηκαν σημαντικές παθολογίες στον σπλήνα, τον μυελό των οστών και τον θύμο αδένα ζώων που είχαν μολυνθεί με ένα στέλεχος που εκφράζει RtxA σε σύγκριση με ένα ισογονικό μεταλλαγμένο rtxA.

Η έκφραση, η ενεργοποίηση και η έκκριση της τοξίνης RtxA απαιτούν πέντε γονίδια, το rtxBDCAtolC. Τα γονίδια rtxB και rtxD κωδικοποιούν ένα σύστημα μεταφορέα ABC που, μαζί με το προϊόν του γονιδίου tolC, αποτελούν ένα πλήρες σύστημα έκκρισης τύπου Ι για την έκκριση τοξίνης. Η αιμολυτική και κυτταροτοξική δράση του RtxA εξαρτάται από την ενεργοποίηση από το RtxC, το οποίο ακυλιώνει δύο υπολείμματα λυσίνης του RtxA. Είναι ενδιαφέρον ότι υπάρχουν δύο διαφορετικές γονιδιωματικές διατάξεις των γονιδίων rtx στο K. kingae. Όλα τα στελέχη που εξετάστηκαν μέχρι σήμερα φαίνεται να διαιρούν τα γονίδια rtx σε δύο ξεχωριστές θέσεις, με ορισμένα στελέχη να έχουν rtxBDC σε μία θέση και rtxCAtolC σε ξεχωριστή θέση, με αποτέλεσμα δύο αντίγραφα του rtxC και ένα αντίγραφο των άλλων τεσσάρων γονιδίων. Άλλα στελέχη έχουν και τα πέντε γονίδια rtxBDCAtolC σε μία θέση και rtxCAtolC στην άλλη θέση, με αποτέλεσμα δύο αντίγραφα των rtxC, rtxA και tolC. Οι λειτουργικές συνέπειες αυτών των διαφορετικών γονιδιακών διατάξεων είναι προς το παρόν άγνωστες.

Η RtxA λειτουργεί ως αιμολυσίνη και κυτοτοξίνη σχηματίζοντας πόρους στη μεμβράνη του κυττάρου ξενιστή και έχει αποδειχθεί ότι σχηματίζει πόρους 1,9 nm σε λιπιδικές διπλοστιβάδες in vitro. Η διαδικασία σχηματισμού πόρων απαιτεί ακυλίωση του RtxA με τη μεσολάβηση του RtxC, ειδικά με αλυσίδες λιπαρών ακυλίων 14 ατόμων άνθρακα, και ο σχηματισμός πόρων ενισχύεται με τη σύνδεση του RtxA με τη χοληστερόλη. Σε αντίθεση με ορισμένα άλλα μέλη της οικογένειας κυτοτοξινών RTX, η  RtxA δεν απαιτεί β2 ιντεγκρίνες για την εισαγωγή στη μεμβράνη, αλλά εξαρτάται από ολιγοσακχαρίτες στην κυτταρική επιφάνεια για βέλτιστη δράση. Εκτός από το ότι εκκρίνεται ελεύθερα, αποδείχθηκε επίσης ότι η RtxA σχετίζεται με κυστίδια εξωτερικής μεμβράνης (OMVs), και αυτά τα OMVs θα μπορούσαν να μεταφέρουν αποτελεσματικά τοξίνες στα κύτταρα ξενιστές.

Ο ρόλος των ινιδίων τύπου IV στην εισβολή

Υπάρχουν πολλές αναφορές ότι προηγούμενη ή ταυτόχρονη ιογενής λοίμωξη του ανώτερου αναπνευστικού συστήματος σχετίζεται με περιπτώσεις διεισδυτικής νόσου K. kingae, γεγονός που υποδηλώνει ότι η βλάβη που προκαλείται από τον ιό, εκτός από τη βλάβη που προκαλείται από την RtxA, στο στοματοφαρυγγικό επιθήλιο μπορεί να παίζει ρόλο στην εισβολή στην κυκλοφορία του αίματος από το K. kingae. Ενώ προς το παρόν δεν υπάρχει γνωστή άμεση σύνδεση μεταξύ των ινιδίων τύπου IV και της εισβολής, σημειώθηκε ότι τα απομονωμένα στελέχη K. kingae που συλλέχθηκαν από την ανώτερη αναπνευστική οδό ήταν πιο πιθανό να εμφανίσουν ινίδια από τα στελέχη που απομονώθηκαν από το αίμα ή το αρθρικό υγρό. Είναι ενδιαφέρον ότι η προσκολλητίνη PilC1 που σχετίζεται με την ινώδη μήτρα και που συζητήθηκε παραπάνω αποδείχθηκε ότι μεσολαβεί στην προσκόλληση στα συστατικά της εξωκυττάριας μήτρας (ECM), λαμινίνη και κολλαγόνο IV, τα οποία βρίσκονται στη βασική μεμβράνη κάτω από τα επιθηλιακά κύτταρα, καθώς και στο κολλαγόνο Ι, το οποίο αποτελεί το ενδιάμεσο στρώμα συνδετικού ιστού κάτω από τη βασική μεμβράνη. Αυτά τα συστατικά της ECM μπορούν να εκτεθούν μετά από βλάβη στο επιθήλιο, παρέχοντας ενδεχομένως μια οδό για την εισβολή και την πρόσβαση του K. kingae στο αγγειακό σύστημα.

Επιβίωση στην κυκλοφορία του αίματος

Πολυσακχαρίδική Κάψα

Για να προκαλέσει διεισδυτική νόσο η K. kingae, πρέπει να επιβιώσει στην κυκλοφορία του αίματος για να διαδοθεί, συνήθως στις αρθρώσεις, τα οστά ή, σπανιότερα, στο ενδοκάρδιο. Το αίμα θεωρείται εχθρικό περιβάλλον για τους εισβάλλοντες μικροοργανισμούς και έχουν εξελιχθεί πολυάριθμες στρατηγικές για την αντίσταση στις έμφυτες και προσαρμοστικές ανοσοποιητικές πιέσεις που υπάρχουν σε αυτό το περιβάλλον. Η ανάπτυξη μιας κάψας πολυσακχαρίτη από πολλά Gram-αρνητικά βακτήρια αποδείχθηκε κρίσιμη για την επιβίωση στην κυκλοφορία του αίματος. Η διερεύνηση των γενετικών απαιτήσεων της καψογένεσης (καψοποίηση) αποκάλυψε πολλαπλούς τόπους κρίσιμους για την επιφανειακή παρουσίαση της κάψας στη K. kingae. Το οπερόνιο ctrABCD απαιτείται για την εξαγωγή της κάψας. Τα γονίδια lipA και lipB είναι και τα δύο απαραίτητα για τον επιφανειακό εντοπισμό της κάψας και ομόλογα αυτών των γονιδίων στο Escherichia coli και τη N. meningitidis αποδείχθηκε ότι συναρμολογούν τον συνδετικό β-Kdo μεταξύ της άγκυρας λιπιδικής μεμβράνης και του πολυσακχαρίτη της κάψας, ενώ  το προϊόν του γονιδίου csaA (που κωδικοποιείται στην περιοχή που ονομάζεται τόπος σύνθεσης κάψουλας) είναι η συνθάση κάψας που απαιτείται για τον πολυμερισμό του πολυμερούς κάψας GalNAc-Kdo του πρωτότυπου στελέχους KK01. Μελέτες μεταλλαξιογένεσης κατευθυνόμενης θέσης που στοχεύουν σε προβλεπόμενα υπολείμματα ενεργού θέσης στην CsaA ταυτοποίησαν αυτήν την πρωτεΐνη ως μια διλειτουργική γλυκοζυλτρανσφεράση υπεύθυνη για την κατάλυση και των δύο συνδέσεων στο πολυμερές κάψουλας GalNAc-Kdo.

Η διερεύνηση της καψοποίησης στον πληθυσμό της K. kingae αποκάλυψε ότι υπάρχουν τέσσερις πολυσακχαρίτες κάψας που αντιπροσωπεύονται σε μια ποικίλη συλλογή κλινικών απομονωμένων στελεχών που ονομάζονται τύποι a, b, c και d. Η κάψα τύπου a είναι ένα πολυμερές του [3)-β-GalpNAc-(1→5)-β-Kdop-(2→], η κάψα τύπου b είναι ένα πολυμερές του [6)-α-D-GlcpNAc-(1→5)-β-(8-OAc)Kdop-(2→], η κάψα τύπου c  είναι ένα πολυμερές του [3)-β-D-Ribf-(1→2)-β-D-Ribf-(1→2)-β-D-Ribf-(1→4)-β-Kdop-(2→], και η κάψα τύπου d είναι ένα πολυμερές του [P-(O→3)[β-D-Galp-(1→4)]-β-D-GlcpNAc-(1→3)-α-D-GlcpNAc-1-]. Αξίζει να σημειωθεί ότι η γονιδιωματική θέση του τόπου σύνθεσης της κάψας διατηρείται σε όλη τη δομή του πληθυσμού της K. kingae, αλλά η  περιεκτικότητα σε γονίδια ποικίλλει ανάλογα με τον τύπο της κάψας.

Εκφράζοντας τους διαφορετικούς τόπους σύνθεσης κάψας (που ονομάζονται csa, csb, csc και csd) σε ένα ισογονικό υπόβαθρο, αποδείχθηκε εμπειρικά ότι το περιεχόμενο αυτού του τόπου ορίζει τον τύπο πολυσακχαρίτη στη K. kingae . Είναι ενδιαφέρον ότι υπάρχει διαφορά στην αναπαράσταση του τύπου κάψας σε στελέχη που συλλέγονται από υγιείς φορείς έναντι στελεχών που συλλέγονται από ασθενείς με διεισδυτική νόσο K. kingae. Ενώ οι κάψες τύπου c και τύπου d μαζί αποτελούν ~30% των υγιών απομονωμένων στελεχών φορέων, αποτελούν μόνο <5% των απομονωμένων στελεχών διεισδυτικής νόσου, γεγονός που υποδηλώνει ότι τα στελέχη που εκφράζουν τις κάψες τύπου a και τύπου b έχουν μεγαλύτερο παθογενετικό δυναμικό.

Οι αρχικές μελέτες που εξέτασαν τις αλληλεπιδράσεις της K. kingae με φυσιολογικό ανθρώπινο ορό αποκάλυψαν υψηλού επιπέδου αντοχή στη λύση που προκαλείται από το συμπλήρωμα. Οι κάψες και ένας επιπλέον εξωκυτταρικός πολυσακχαρίτης που ονομάζεται εξωπολυσακχαρίτης γαλακτάνης  βρέθηκαν να ενισχύουν την επιβίωση στον ανθρώπινο ορό μέσω της πρόληψης του παράγοντα συμπληρώματος και της οψωνοποίησης αντισωμάτων στην βακτηριακή επιφάνεια. Επιπλέον, μεταλλαγμένα στελέχη που δεν είχαν κάψα εμφάνισαν έναν ενδιάμεσο φαινότυπο λοιμογόνου δράσης στο μοντέλο μόλυνσης νεαρών αρουραίων. Μελέτες αλληλεπιδράσεων in vitro μεταξύ K. kingae και ανθρώπινων ουδετερόφιλων αποκάλυψαν ότι η κάψα παίζει βασικό ρόλο στην πρόληψη των αλληλεπιδράσεων βακτηρίων-ουδετερόφιλων και στην πρόληψη της θανάτωσης που προκαλείται από ουδετερόφιλα. Η κάψα εμπλέκεται ειδικά στην εξασθένηση της ικανότητας των ουδετερόφιλων να παράγουν δραστικά είδη οξυγόνου.

Εξωπολυσακχαρίτης γαλακτάνης

Ο Bendaoud et al. διαπίστωσαν ότι τα εκχυλίσματα K. kingae περιείχαν μια ουσία που εμφάνιζε ευρέος φάσματος αντι-βιοϋμενική δράση . Χημικές και δομικές αναλύσεις αποκάλυψαν ότι αυτό το υλικό, που συλλέχθηκε από το κλινικό απομονωμένο PYKK181, ήταν ένα ομοπολυμερές γαλακτοφουρανόζης με τη δομή [▯→3)-β-Galf-(1→6)-β-Galf-(1→]n. Η σύνθεση αυτού του πολυσακχαρίτη εξαρτιόταν από τα γονίδια pamA, pamB και pamC, καθώς η έκφραση αυτών των τριών γονιδίων στο E. coli είχε ως αποτέλεσμα την παραγωγή της γαλακτάνης.. Η ανάλυση του στελέχους KK01 αποκαλύπτει μια παρόμοια γαλακτάνη με διαφορετική σύνδεση που συνδέει τα υπολείμματα γαλακτοφουρανόζης: [→5)-β-Galf-(1→]n [27]. Αυτές είναι οι μόνες δύο τεκμηριωμένες δομές γαλακτάνης στη K. kingae και απαιτούνται πρόσθετες αναλύσεις για να προσδιοριστεί η έκταση της παραγωγής γαλακτάνης και η ποικιλομορφία των δομών γαλακτάνης σε αυτό το είδος.

Όπως και η κάψα πολυσακχαρίτη, η γαλακτάνη έχει επιδείξει ρόλους στην ανοσολογική αποφυγή. Συγκεκριμένα, η γαλακτάνη μπορεί ανεξάρτητα να αποτρέψει την εναπόθεση παράγοντα συμπληρώματος και αντισωμάτων στην βακτηριακή επιφάνεια και να προωθήσει την επιβίωση στον ορό. Επίσης, όπως και η κάψα, οι μεταλλάξεις που δεν διαθέτουν τη γαλακτάνη ήταν εξασθενημένες αλλά όχι εντελώς μη λοιμώδεις στο μοντέλο λοίμωξης νεαρών αρουραίων.

Ο ρόλος της γαλακτάνης στις αλληλεπιδράσεις με τα ουδετερόφιλα είναι διαφορετικός από την κάψα. Παίζει ρόλο στην πρόληψη της φαγοκυττάρωσης των ουδετερόφιλων και έχει έναν επιπλέον ρόλο στην αντίσταση στις βακτηριοκτόνες επιδράσεις των αντιμικροβιακών πεπτιδίων. Δεδομένων αυτών των λειτουργιών, προτάθηκε ότι η γαλακτάνη συνδέεται με την βακτηριακή επιφάνεια μέσω ενός άγνωστου μηχανισμού  και αυτός είναι ένας ενεργός τομέας έρευνας.

Διείσδυση στις Αρθρώσεις και στα  Οστά

Οι παράγοντες και οι μηχανισμοί που χρησιμοποιεί η K. kingae για να απομακρυνθεί από το αγγειακό σύστημα και να εισβάλει στις θέσεις της διεισδυτικής νόσου, κυρίως στις αρθρώσεις και τα οστά, είναι σε μεγάλο βαθμό ανεξερεύνητοι. Δεν υπάρχουν επί του παρόντος δημοσιευμένες μελέτες που να εξετάζουν την προσκόλληση του K. kingae στα ενδοθηλιακά κύτταρα ή τους μηχανισμούς της ενδοθηλιακής ρήξης. Λόγω των περιορισμών του μοντέλου μόλυνσης από νεαρούς αρουραίους, ένα καλύτερο ζωικό μοντέλο που να μοιάζει περισσότερο με τη φυσική ανθρώπινη λοίμωξη θα είναι κρίσιμο για την κατανόηση αυτού του βήματος στην παθογένεση της νόσου K. kingae.

Ο τρόπος με τον οποίο ρυθμίζονται οι προαναφερθέντες παράγοντες λοιμογόνου δράσης, καθώς και οι άγνωστοι παράγοντες λοιμογόνου δράσης, και ο τρόπος με τον οποίο αλληλεπιδρούν στα διάφορα στάδια της λοίμωξης είναι επίσης σε μεγάλο βαθμό άγνωστος. Τα επίπεδα ινιδιογένεσης ποικίλλουν σημαντικά στον πληθυσμό της K. kingae και τα στελέχη που απομονώνονται από θέσεις διεισδυτικής νόσου είναι λιγότερο πιθανό να εμφανίσουν ινίδια από τα αναπνευστικά απομονωμένα στελέχη, γεγονός που υποδηλώνει ότι η ινιδιογένεση μειώνεται ή επιλέγεται καθώς τα βακτήρια δημιουργούν εστιακές μολύνσεις σε κανονικά στείρες θέσεις του σώματος. Η K. kingae διαθέτει ένα σύστημα μεθυλίωσης τύπου III μεταβλητής φάσης που τροποποιεί την έκφραση πολυάριθμων γονιδίων μέσω της δράσης της μεθυλοτρανσφεράσης ModK. Σε αυτό το ρυθμιστόνιο περιλαμβάνεται το/τα γονίδιο/α rtxA, υποδεικνύοντας ότι η έκφραση τοξίνης ρυθμίζεται προσεκτικά, αν και από άγνωστα περιβαλλοντικά σήματα. Μελλοντικές μελέτες είναι απαραίτητες για να αποκαλυφθούν τόσο οι μηχανισμοί της διείσδυσης στις αρθρώσεις και τα οστά όσο και τα ρυθμιστικά σήματα που διέπουν αυτόν τον τροπισμό των ιστών.

ΚΛΙΝΙΚΗ ΕΙΚΟΝΑ

Σηπτική Αρθρίτιδα Οφειλόμενη στο Kingella kingae

Η σηπτική αρθρίτιδα είναι αναμφισβήτητα η πιο κοινή μορφή οστεοαρθρικής νόσου της K. kingae. Στην πραγματικότητα, ορισμένες αναφορές έδειξαν ότι η σηπτική αρθρίτιδα αντιπροσωπεύει μεταξύ 53 και 82,8% όλων των οστεοαρθρικών νόσων που οφείλονται σε αυτό το παθογόνο. 

Η σηπτική αρθρίτιδα από K. kingae συνήθως περιλαμβάνει μεγάλες αρθρώσεις που φέρουν βάρος, όπως το ισχίο, το γόνατο, τον αστράγαλο, τον ώμο ή τον αγκώνα. 

Όσον αφορά τη συχνότητα, η λοίμωξη τείνει να περιλαμβάνει το κάτω άκρο περισσότερο, και το γόνατο είναι η άρθρωση που ενοχοποιείται συχνότερα.

Ωστόσο, άτυπες αρθρώσεις, όπως οι στερνοκλειδικές, οι ακρωμιοκλειδικές, οι ταρσικές ή οι μετακαρποφαλαγγικές/μεταταρσοφαλαγγικές αρθρώσεις, υπερεκπροσωπούνται στην αρθρίτιδα από K. kingae σε σύγκριση με τη σηπτική αρθρίτιδα που προκαλείται από άλλα παθογόνα. Δυστυχώς, οι κλινικές και βιολογικές πτυχές της σηπτικής αρθρίτιδας μπορούν να περικοπούν όταν το K. kingae είναι υπεύθυνο για τη λοίμωξη.

Η εξέταση του αρθρικού υγρού σε παιδιά με αποδεδειγμένη με καλλιέργεια αρθρίτιδα λόγω του K. kingae έδειξε χαμηλό αριθμό λευκοκυττάρων σε σημαντικό αριθμό περιπτώσεων. Σε αυτό το σημείο, η αναγνωρισμένη τιμή αποκοπής των 50.000 WBC/mL σε αναρροφήσεις αρθρικού υγρού, που χρησιμοποιείται ως διαγνωστικός παράγοντας που ορίζει τη βακτηριακή αρθρίτιδα, μπορεί να αποκλείσει εσφαλμένα τη διάγνωση της αρθρίτιδας από K. kingae και, ως εκ τούτου, θα πρέπει να χρησιμοποιείται με μεγάλη προσοχή. Στην πραγματικότητα, μερικές μελέτες κατέδειξαν ότι ο αριθμός των λευκών αιμοσφαιρίων του αρθρικού υγρού έδειξε λιγότερα από 50.000 WBC/mL στο ένα τέταρτο των περιπτώσεων, και ότι η εξέταση της χρώσης Gram είναι, τις περισσότερες φορές, αρνητική.

Έτσι, η απύρετη εικόνα, τα ήπια κλινικά συμπτώματα και η απουσία ή η μικρή διαταραχή των πρωτεινών οξείας φάσης στην αρθρίτιδα από K. kingae δεν πληρούν τα διαγνωστικά κριτήρια μιας σηπτικής άρθρίτιδας]. Ακόμα χειρότερα, όταν χρησιμοποιείται η εφαρμογή του προγνωστικού αλγορίθμου του Kocher, φαίνεται ότι τα τρία τέταρτα των παιδιών σηπτική αρθρίτιδα ισχίου από K. kingae αποδεδειγμένη με καλλιέργεια θα θεωρούνταν ότι είχαν παροδική υμενίτιδα. Η κλινική εμπειρία μας έχει διδάξει ότι αυτός ο αλγόριθμος δεν πρέπει να χρησιμοποιείται για παιδιά ηλικίας κάτω των 4 ετών.

Τέλος, η κλινική πορεία της σηπτικής αρθρίτιδας λόγω K. kingae είναι πολύ διαφορετική από αυτήν της αρθρίτιδας που προκαλείται από πυογόνους μικροοργανισμούς, οι οποίοι διεγείρουν μια τεράστια εισροή ουδετερόφιλων στην περιοχή.

Στη σηπτική αρθρίτιδα που οφείλεται σε πυογόνα παθογόνα, η κλινική πορεία χαρακτηρίζεται από ισχυρή ενεργοποίηση της ανοσολογικής απόκρισης, σε συνδυασμό με υψηλά επίπεδα κυτοκινών και δραστικών ειδών οξυγόνου, και αύξηση στην απελευθέρωση μεταλλοπρωτεϊνασών του πλέγματος του ξενιστή και άλλων ενζύμων που αποικοδομούν το κολλαγόνο, τα οποία, σε συνδυασμό με βακτηριακές τοξίνες, οδηγούν σε καταστροφή του χόνδρου των αρθρώσεων. Επιπλέον, η φλεγμονώδης απόκριση που προκαλείται από το αντιγόνο μπορεί να επιμένει και να συνεχίζει να βλάπτει την αρχιτεκτονική των αρθρώσεων ακόμη και μετά την εξάλειψη της λοίμωξης. Ευτυχώς, η κλινική εμπειρία που αποκτήθηκε κατά τη διαχείριση της οστεοαρθρίτιδας με K. kingae φαίνεται να καταδεικνύει ότι η αρθρίτιδα που οφείλεται σε αυτό το συγκεκριμένο παθογόνο δεν ακολουθεί αυτό το πρότυπο καταστροφής του χόνδρου.

Επομένως, πολλές περιπτώσεις σηπτικής αρθρίτιδας από K. kingae μπορούν ακόμη και να αντιμετωπιστούν με μια απλή διαδικασία έγχυσης με σύριγγα - αναρρόφησης, και έτσι, ειδικά όταν ο αριθμός των λευκοκυττάρων φαίνεται χαμηλός στην εξέταση του αρθρικού υγρού, η στάση αυτή δεν θα είναι δικαιολογημένη στην πυογενή σηπτική αρθρίτιδα.

 Οστεομυελίτιδα από K. kingae

Οι ανατομικές θέσεις που επηρεάζονται από την οστεομυελίτιδα από K. kingae περιλαμβάνουν μακρά οστά, όπως το μηριαίο οστό, την κνήμη, το βραχιόνιο οστό, την κερκίδα και την ωλένη . Παρ' όλα αυτά, οποιοδήποτε οστό που σπάνια μολύνεται από άλλα παθογόνα, όπως το στέρνο, η κλείδα, ο αστράγαλος ή η πτέρνα, μπορεί επίσης να επηρεαστεί από οστεομυελίτιδα από K. kingae.

Η οστεομυελίτιδα από K. kingae αντιπροσωπεύει μεταξύ 15 και 31% όλων των οστεοαρθριτικών λοιμώξεων που οφείλονται σε αυτό το παθογόνο και περισσότερο από το ένα τέταρτο αυτής της οστεομυελίτιδας συνυπάρχει με σηπτική αρθρίτιδα.

Είναι επίσης ενδιαφέρον να επισημανθεί ότι η επίφυση ή η απόφυση, οι οποίες σχεδόν ποτέ δεν επηρεάζονται από άλλους οργανισμούς, μπορεί να εμπλέκονται συχνά στην οστεομυελίτιδα από K. kingae.

Ορισμένες αναφορές έχουν υποδείξει ότι ασθενείς με μεμονωμένη οστεομυελίτιδα είχαν μεγαλύτερη διάρκεια συμπτωμάτων πριν από την εισαγωγή και παρουσίασαν χαμηλότερη θερμοκρασία σώματος σε σύγκριση με παιδιά με μόνο σηπτική αρθρίτιδα.

 Χωρίς κατάλληλη θεραπεία, η οξεία οστεομυελίτιδα μπορεί ύπουλα να εξελιχθεί σε υποξεία οστεομυελίτιδα.

Η υποξεία οστεομυελίτιδα είναι μια άτυπη οστεομυελίτιδα που πιθανότατα αποδίδεται σε μια άτυπη σχέση ξενιστή-παθογόνου που μπορεί να εξηγηθεί από οποιονδήποτε συνδυασμό:

-αυξημένης αντοχής ξενιστή

-μειωμένης λοιμογόνου δράσης του αιτιολογικού παθογόνου ή/και

-προηγούμενης έκθεσης σε αντιβιοτικά.

Στις περισσότερες περιπτώσεις, οι μέθοδοι που βασίζονται σε καλλιέργειες αποτυγχάνουν να εντοπίσουν τον αιτιολογικό οργανισμό, ειδικά όταν πραγματοποιείται παρακέντηση με λεπτή βελόνα. Η χειρουργική παροχέτευση μπορεί να δώσει θετικές καλλιέργειες στο 40% έως 75% των ασθενών. Η υποξεία οστεομυελίτιδα μπορεί να χωριστεί σε δύο κύριες κλινικές μορφές ανάλογα με την ηλικία των παιδιών και την βακτηριολογική της αιτιολογία.

Η πρώτη μορφή, που ονομάζεται βρεφική μορφή, επηρεάζει παιδιά ηλικίας μεταξύ 6 μηνών και 4 ετών. Περίπου το 90% όλων των PSAHO (primary subacute hematogenous osteomyelitis) επηρεάζουν ασθενείς σε αυτήν την ηλικιακή ομάδα, με το K. kingae ως τον κύριο παρατηρούμενο μικροοργανισμό. Σε αυτά τα μικρά παιδιά, η κλινική πορεία πιθανότατα αποδίδεται στη φυσική χαμηλή λοιμογόνο δράση του K. kingae. Πολλά παιδιά σε αυτήν την ηλικιακή ομάδα συνήθως αναγνωρίζονται αργά ως πάσχοντα από οστεοαρθρική λοίμωξη και η ακριβής διάγνωση γενικά καθυστερεί μετά την εμφάνιση οστικής λυτικής βλάβης.

Η δεύτερη μορφή, με τίτλο νεανική μορφή, επηρεάζει παιδιά ηλικίας άνω των 4 ετών και ο S. aureus εμφανίζεται ως το κύριο υπεύθυνο παθογόνο. Η υποξεία οστεομυελίτιδα που οφείλεται στο K. kingae ακολουθεί καλοήθη πορεία και η συνιστώμενη θεραπεία για την υποξεία οστεομυελίτιδα, όταν οι ακτινογραφικές εξετάσεις δείχνουν διαυγείς αλλοιώσεις ή εστίες, είναι η απόξεση, η βιοψία και η καλλιέργεια, ακολουθούμενη από αντιβιοτικά. Ωστόσο, ορισμένοι συγγραφείς έχουν υποστηρίξει ότι τα αντιβιοτικά από μόνα τους μπορεί να είναι επαρκή και ότι η χειρουργική επέμβαση θα πρέπει να προορίζεται μόνο για «επιθετικές αλλοιώσεις», καθώς και για εκείνες που δεν ανταποκρίνονται στα αντιβιοτικά.

Ωστόσο, είναι γενικά αποδεκτό ότι η θεραπεία δεν πρέπει να ξεκινά μέχρι να ληφθούν σωστά η παροχέτευση και τα βακτηριολογικά δείγματα.

Άλλες Άτυπες Οστεοαρθρικές Λοιμώξεις που Προκαλούνται από το K. Kingae

 Εκτός από την αρθρίτιδα και την οστεομυελίτιδα, η σπονδυλοδισκίτιδα είναι πιθανώς η κύρια συχνή μορφή διεισδυτικής λοίμωξης από K. kingae σε παιδιά ηλικίας κάτω των 4 ετών. Η παιδική σπονδυλοδισκίτιδα είναι ένας όρος που χρησιμοποιείται συχνά για να περιγράψει μια συνέχεια λοιμώξεων της σπονδυλικής στήλης, από τη δισκίτιδα έως τη σπονδυλοδισκίτιδα, καθώς και την σπονδυλική οστεομυελίτιδα με περιστασιακά συνοδά αποστήματα μαλακών ιστών.

Δισκίτιδα → σπονδυλοδισκίτιδα → σπονδυλική οστεομυελίτιδα → αποστήματα μαλακών ιστών

Τρεις κύριες κλινικές μορφές σπονδυλοδισκίτιδας γενικά έχουν περιγραφεί στον παιδιατρικό πληθυσμό ανάλογα με την ηλικία του ασθενούς.

Η νεογνική μορφή επηρεάζει βρέφη κάτω των 6 μηνών και είναι η πιο σοβαρή εκδήλωση της νόσου, συχνά εμφανιζόμενη με σηψαιμία από Staphylococcus aureus και πολλαπλές μολυσματικές εστίες.

Η βρεφική μορφή επηρεάζει παιδιά από 6 μηνών (τέλος της μητρικής ανοσίας) έως 48 μηνών, και αυτή η ηλικιακή ομάδα αντιπροσωπεύει το 80% της παιδικής σπονδυλοδισκίτιδας. Σε αυτήν την ομάδα, ορισμένες μελέτες έχουν υποδείξει ότι το K. kingae θα μπορούσε να είναι ο πιο συχνός μικροοργανισμός που ευθύνεται για τη λοίμωξη της σπονδυλικής στήλης .

Τέλος, στην τρίτη μορφή, που επηρεάζει παιδιά άνω των 4 ετών, οι ασθενείς είναι πιο επιρρεπείς στο να έχουν πυρετό και να έχουν κακή εμφάνιση και να υποφέρουν από σπονδυλική οστεομυελίτιδα λόγω του S. aureus.

Αυτή η τριφασική ηλικιακή κατανομή χρησιμοποιείται ευρέως σήμερα μεταξύ των παιδοορθοπεδικών, καθώς εξηγεί τόσο τη διαφορετική μικροβιολογική επιδημιολογία όσο και τις διαφορετικές κλινικές μορφές μεταξύ των ηλικιακών ομάδων.

 

Οι επεμβατικές λοιμώξεις από K. kingae μπορούν επίσης να προκαλέσουν άτυπες οστεοαρθρικές λοιμώξεις, όπως κυτταρίτιδα, πυομυοσίτιδα, θυλακίτιδα και λοιμώξεις του τένοντα. Επομένως, προτείνουμε τη χρήση και την ενσωμάτωση της μαγνητικής τομογραφίας σε σύγχρονους διαγνωστικούς αλγόριθμους για την οστεοαρθρίτιδα (ΟΑΙ) για την καλύτερη αναγνώριση ασυνήθιστων θέσεων ΟΑΛοιμώξεων

 Κλινικές και Βιολογικές Πτυχές της ΟΑΛ λόγω Kingella kingae

Η κλινική εικόνα των ΟΑΛ από K. kingae συχνά χαρακτηρίζεται από ήπια κλινική εικόνα και από μέτρια βιολογική φλεγμονώδη απόκριση στη λοίμωξη, με αποτέλεσμα αυτά τα παιδιά να παρουσιάζουν λίγα, αν όχι καθόλου, κριτήρια που να υποδηλώνουν ΟΑΙ. Στην πραγματικότητα, τα περισσότερα παιδιά με ΟΑΙ λόγω K. kingae εμφανίζονται σε άριστη γενική κατάσταση. Συνήθως παρουσιάζουν συμπτωματολογία που υποδηλώνει μυοσκελετική νόσο με

-περιορισμό κινητικότητας  μέλους

-χωλότητα ή

-άρνηση στήριξης βάρους.

Τα σημεία κατά την κλινική εξέταση θα περιστρέφονται γύρω από εντοπισμένο πόνο, περιορισμένο αρθρικό εύρος κίνησης ή μη τραυματικό οίδημα. Ωστόσο, μπορεί να είναι πολύ δύσκολο να προσδιοριστεί, σε ορισμένες περιπτώσεις, ακόμη και πού βρίσκεται το επίκεντρο του πόνου.

Επιπλέον, μόνο το 10 έως 33% των παιδιών με ΟΑΛ που προκαλείται από K. kingae έχουν θερμοκρασία σώματος ≥38 °C κατά την εισαγωγή.Πρόσφατες αναφορές για μεγάλες σειρές έδειξαν ότι ο πυρετός απουσίαζε σε ποσοστό μεταξύ 71 και 74% των παιδιών με αποδεδειγμένη οστεοαρθρίτιδα (ΟΑ) λόγω K. kingae. Οι περισσότεροι ασθενείς έχουν φυσιολογικό ή σχεδόν φυσιολογικό αριθμό λευκών αιμοσφαιρίων και επίπεδα C-αντιδρώσας πρωτεΐνης.

Στη μεγαλύτερη σειρά για ΟΑΛ  λόγω K. kingae, βρέθηκε αριθμός λευκών αιμοσφαιρίων <15.000 κύτταρα/mm3 στο 51% των ασθενών για τους οποίους υπήρχαν διαθέσιμα δεδομένα .

Σε μια πρόσφατη ελβετική μελέτη σε 151 ασθενείς με ΟΑΛ λόγω K. kingae, ο μέσος αριθμός λευκών αιμοσφαιρίων ήταν 11,9 × 109/L και η απόλυτη τιμή θεωρήθηκε αυξημένη μόνο στο 11,2% των περιπτώσεων. Στην ίδια μελέτη, το επίπεδο CRP ήταν αυξημένο (>10 mg/L) στο 61% των ασθενών, αλλά η διάμεση τιμή CRP όλων των περιπτώσεων ήταν μόνο 15,5 mg/L. Μερικές μελέτες υπέδειξαν ότι η ταχύτητα καθίζησης ερυθροκυττάρων και ο αριθμός των αιμοπεταλίων φαίνεται να είναι οι πιο ευαίσθητοι δείκτες φλεγμονής όταν υπάρχει οστεοαρθρίτιδα από K. kingae.

Έχουν περιγραφεί διαφορετικά μοντέλα που επιτρέπουν τη διαφοροποίηση της οστεοαρθρίτιδας από K. kingae από εκείνα που οφείλονται σε τυπικά παθογόνα, σε παιδιά ηλικίας κάτω των 4 ετών.

Το πρώτο μοντέλο βασίστηκε στις ακόλουθες τέσσερις παραμέτρους:

-θερμοκρασία κατά την εισαγωγή <38 °C

-C-αντιδρώσα πρωτεΐνη <55 mg/L

-αριθμός λευκών αιμοσφαιρίων <14.000 λευκοκύτταρα/mm3 και

-άωρα ουδετερόφιλα <150 μορφές/mm3.

Σε μια άλλη μελέτη, οι ίδιοι συγγραφείς προσπάθησαν να ορίσουν ένα μοντέλο για την ακριβή διάκριση μεταξύ MSSA και K. kingae. Το εν λόγω μοντέλο για την πρόβλεψη της οστεοαρθρίτιδας από K. kingae περιελάμβανε τα ακόλουθα όρια για κάθε παράμετρο:

-ηλικία <43 μηνών

-θερμοκρασία κατά την εισαγωγή <37,9 °C

-CRP <32,5 mg/L και

-αριθμός αιμοπεταλίων >361.500/mm3

Ακτινολογικές Εξετάσεις για Οστεοαρθρίτιδα από K. Kingae

Οι παιδίατροι έχουν πλέον μάθει ότι η οστεομυελίτιδα που προκαλείται από K. kingae θα μπορούσε να έχει μια πολύ ιδιαίτερη ακτινολογική εικόνα λόγω της χαμηλής λοιμογόνου δράσης αυτού του παθογόνου. Σήμερα αναγνωρίζεται ότι η οστεομυελίτιδα που προκαλείται από K. kingae μπορεί να έχει μεγαλύτερη διάρκεια συμπτωμάτων πριν από την εισαγωγή και να παρουσιάζεται με χαμηλότερη θερμοκρασία σώματος σε σύγκριση με τα παιδιά με οστεομυελίτιδα που οφείλεται σε πυογόνα παθογόνα. Έτσι, η οστεομυελίτιδα που προκαλείται από K. kingae μπορεί εύκολα να μην αναγνωριστεί ή ακόμα και να θεωρηθεί ασήμαντη στην αρχή και να εξελιχθεί ύπουλα σε υποξεία οστεομυελίτιδα.

Ακτινολογικά, αυτή η υποξεία οστεομυελίτιδα μπορεί να εμφανιστεί με τη μορφή λυτικών αλλοιώσεων. Είναι επίσης ενδιαφέρον να επισημανθεί ότι η επίφυση ή η απόφυση, οι οποίες σχεδόν ποτέ δεν προσβάλλονται από άλλους οργανισμούς, μπορεί να εμπλέκονται συνήθως στην οστεομυελίτιδα από K. kingae. Από αυτή την άποψη, φαίνεται προφανές για τους παιδοορθοπεδικούς ότι τυχόν λυτικές αλλοιώσεις που εμφανίζονται σε ένα παιδί κάτω των 4 ετών θα υποδηλώνουν πολύ υποξεία οστεομυελίτιδα από K. kingae.

Από την άλλη πλευρά, είναι ευρέως αποδεκτό ότι η πρώιμη μαγνητική τομογραφία μπορεί να είναι χρήσιμη στη διερεύνηση και τη διαχείριση των ΟΑΛ. Είναι αξιόπιστη για την αξιολόγηση της βιωσιμότητας και της ροής αίματος στο μολυσμένο οστό, για την αναγνώριση αποστημάτων οστών και μαλακών ιστών που χρειάζονται χειρουργική παροχέτευση, για την ανίχνευση αρθρικής συλλογής ή διάτασης της κάψας και για την κατεύθυνση βιοψιών. Η μαγνητική τομογραφία είναι επίσης χρήσιμη στη διάγνωση της αρθρίτιδας και είναι σε θέση να διακρίνει μεταξύ διαφορετικών τύπων αρθρίτιδας. Η κλινική εμπειρία έχει διδάξει στους παιδοορθοπεδικούς ότι η μαγνητική τομογραφία είναι ακόμη πιο σημαντική στη διερεύνηση λοιμώξεων από K. kingae. Στην πραγματικότητα, η ΟΑΛ που προκαλείται από K. kingae μπορεί να είναι αρκετά ετερογενής και μπορεί να λάβει πολύ διαφορετικές μορφές, όπως

-μεμονωμένη αρθρίτιδα

-οστεομυελίτιδα

-ταυτόχρονη αρθρίτιδα και οστεομυελίτιδα

-μυϊκό απόστημα ή

-λοίμωξη του τένοντα.

Ακόμα κι αν η ΟΑΛ που οφείλεται σε K. kingae φαίνεται κλινικά λιγότερο σοβαρή, η χρήση και η ενσωμάτωση της μαγνητικής τομογραφίας σε σύγχρονους διαγνωστικούς αλγόριθμους για αυτές τις ΟΑΛ θα πρέπει να λαμβάνεται υπόψη για την καλύτερη αναγνώριση των άτυπων θέσεων αυτών των συγκεκριμένων και άτυπων λοιμώξεων. Είναι ενδιαφέρον ότι έχει αποδειχθεί ότι η μαγνητική τομογραφία έχει υψηλή ακρίβεια στη διάκριση της ΟΑΛ που οφείλεται σε K. kingae από εκείνες που προκαλούνται από Gram θετικούς κόκκους.

Η ήπια αντίδραση μαλακών ιστών, η απουσία ή η ήπια αντίδραση των οστών και η εμπλοκή του επιφυσιακού χόνδρου είναι ευρήματα που υποδηλώνουν K. kingae και όχι Gram θετικούς κόκκους. Δεδομένου ότι η μαγνητική τομογραφία (MRI) πραγματοποιείται συχνά πριν γίνουν διαθέσιμα τα βακτηριολογικά αποτελέσματα, η διάγνωση με βάση την εικόνα μπορεί να αποτελέσει ένα χρήσιμο συμπληρωματικό εργαλείο για τη διαφοροποίηση της OAΛ που προκαλείται από K. kingae από την οστεοαρθρίτιδα που προκαλείται από πιο επιθετικούς οργανισμους

Βακτηριαιμία

Η βακτηριαιμία από K kingae χωρίς ενδείξεις ενδοκαρδίτιδας έχει παρατηρηθεί κυρίως σε παιδιά, και σε λίγους ενήλικες. Συνυπάρχουσες λοιμώξεις του σκελετικού,

αναπνευστικού ή κεντρικού νευρικού συστήματος ήταν παρούσες σε ορισμένους ασθενείς, αλλά δεν παρατηρήθηκε εστία (λανθάνουσα βακτηριαιμία) στους περισσότερους άλλους. Λόγω του κινδύνου ενδοκαρδίτιδας, έχει υποστηριχθεί έντονα η αξιολόγηση όλων των ενήλικων ασθενών με βακτηριαιμία από K kingae

για τον αποκλεισμό ενδοκαρδιακής διήθησης.

Ένα κηλιδοβλατιδώδες εξάνθημα που μοιάζει με διάχυτη μηνιγγιτιδοκοκκική ή γονοκοκκική λοίμωξη έχει περιγραφεί σε λίγους βακτηριαιμικούς ασθενείς.

Ενδοκαρδίτιδα

Το K kingae περιλαμβάνεται στην ομάδα οργανισμών HACEK (haemophilus, acinetobacter, cardiobacterium, eikenella και kingella) που είναι συλλογικά υπεύθυνοι για 3–5% όλων των περιπτώσεων βακτηριακής ενδοκαρδίτιδας. Σε αντίθεση με ό,τι έχει παρατηρηθεί σε άλλες λοιμώξεις από K kingae, η ενδοκαρδίτιδα έχει διαγνωστεί ιδιαίτερα σε παιδιά σχολικής ηλικίας, εφήβους και ενήλικες ασθενείς. 15 παιδιά και 13 ενήλικες με ενδοκαρδίτιδα φυσικής βαλβίδας, που αφορά κυρίως τη μιτροειδή βαλβίδα, έχουν περιγραφεί με λεπτομέρεια. Προδιαθεσικοί παράγοντες όπως συγγενείς καρδιακές δυσπλασίες, ή ρευματική βαλβιδική νόσος, ήταν συχνοί, αλλά ορισμένοι ασθενείς είχαν

προηγουμένως φυσιολογικές βαλβίδες. Επιπλέον, έχουν αναφερθεί πέντε ενήλικες και δύο παιδιά ηλικίας 9–16 ετών με ενδοκαρδίτιδα προσθετικής βαλβίδας.

 

Λοιμώξεις του κατώτερου αναπνευστικού συστήματος

Η K kingae έχει απομονωθεί από το αίμα ή τις αναπνευστικές εκκρίσεις προηγουμένως υγιών και ανοσοκατεσταλμένων ενηλίκων και παιδιατρικών ασθενών με παθήσεις του κατώτερου αναπνευστικού συστήματος όπως λαρυγγοτραχειοβρογχίτιδα, επιγλωττίτιδα, πνευμονία, ή πυοθώρακα.

Μηνιγγίτιδα, οφθαλμικές λοιμώξεις και στοματίτιδα

Η ηλικιακή κατανομή των λίγων ασθενών με μηνιγγίτιδα από K kingae που αναφέρονται στη βιβλιογραφία είναι άτυπη, καθώς οι περισσότερες περιπτώσεις έχουν εμφανιστεί σε εφήβους και νεαρούς ενήλικες.

Η K kingae έχει απομονωθεί από ασθενείς με ποικιλία οφθαλμικών λοιμώξεων όπως απόστημα βλεφάρων, ενδοφθαλμίτιδα,  και απόστημα κερατοειδούς.

Σε πρόσφατη αναφορά, η K kingae απομονώθηκε σε καθαρή καλλιέργεια από τα στοματικά κυστίδια ενός ενήλικα ανοσοεπαρκούς ασθενούς που παρουσίασε ήπιο πυρετό, γενική αδιαθεσία, πονόλαιμο, στοματίτιδα και διόγκωση και πόνους στους τραχηλικούς λεμφαδένες. Οι ιικές καλλιέργειες ήταν αρνητικές για ιούς έρπητα. Αν και η λοίμωξη από τον ιό Coxsackie δεν αποκλείστηκε οριστικά, οι συγγραφείς έθεσαν το

πιθανότατα η K kingae θα μπορούσε να έχει προκαλέσει τις στοματικές αλλοιώσεις

από μόνη της.

ΔΙΑΓΝΩΣΗ

Δείγματα : μπορεί να απομονωθεί από το αίμα , το αρθριτικό υγρό, το οστό, το ΕΝΥ, τις εκκρίσεις του αναπνευστικού και από άλλα σημεία της λοίμωξης

Ανάπτυξη : αερόβιες συνθήκες με αυξημένο διοξείδιο του άνθρακα (5-10%)

Καλλιέργεια : σε ασθενείς με σηπτική αρθρίτιδα ή οστεομυελίτιδα , οι κ/ες αίματος είναι συνήθως ΑΡΝΗΤΙΚΕΣ. Απομονώνεται δύσκολα στα συνήθη στερεά καλλιεργητικά μέσα

Το αρθριτικό υγρό και οι οστικές αναρροφήσεις θα πρέπει να επωάζονται σε σύστημα  στερεών  μέσων και καλλιέργειας αίματος για 5-7 ημέρες , έτσι ώστε να μεγιστοποιηθεί η ανάπτυξη του μικροοργανισμού. Εφόσον αναπτυχθεί τότε υπάρχουν οι παρακάτω επιλογές :

-βιοχημικές δοκιμασίες

-μαζική φασματομετρία των βακτηριακών κυτταρικών συστατικών

-PCR

ΘΕΡΑΠΕΙΑ

Δεδομένου ότι μεταξύ μερικών στελεχών εμφανίζεται κάποια β-λακταμική αντιβιοτική αντίσταση, για τα παιδιά με ΟΑΛ που αποδίδονται σε K.Kingae, χορηγείται αμπικιλλίνη-σουλμπακτάμη ή 1^ης, 2^ης, ή 3^ης γενιάς κεφαλοσπορίνες

Για πιο διεισδυτικές ή σοβαρές λοιμώξεις (πχ ενδοκαρδίτιδα), η αγωγή θα πρέπει να περιλαμβάνει μια 3^ης γενιάς κεφαλοσπορίνη ή αμπικιλλίνη και μια αμινογλυκοσίδη

Η K.Kingae είναι συνήθως εξαιρετικά ευαίσθητη στις πενικιλλίνες και στις κεφαλοσπορίνες 1^ης, 2^ης, 3^ης γενιάς. Η in vitrο ευαισθησία έναντι οξακιλλίνης παρουσιάζει μια σχετική ελάττωση, ενώ έχει αναφερθεί η παραγωγή μιας ΤΕΜ-1 β-λακταμάσης σε κάποιες χώρες του κόσμου, με αποτέλεσμα τη χαμηλού βαθμού αντίσταση στην πενικιλλίνη και την αμπικιλλίνη. Αυτή η ΤΕΜ-1 β-λακταμάση είναι ευαίσθητη στους αναστολείς β-λακταμασών και δεν παρουσιάζει δραστηριότητα έναντι των κεφαλοσπορινών 2^ης & 3^ης γενιάς.

Σχεδόν όλα τα στελέχη είναι ευαίσθητα στις αμινογλυκοσίδες, μακρολίδες, ΤΜΡ-ΣΜΞ, τετρακυκλίνες & φθοριοκινολόνες.

Σχεδόν το 40 ως 100% των στελεχών είναι ανθεκτικά στην κλινδαμυκίνη, βανκομυκίνη και τριμεθοπρίμη Ιαν και είναι ευαίσθητα στην ΤΜΠ-ΣΜΞ)

ΠΡΟΛΗΨΗ

Επειδή ο κίνδυνος ασυμπτωματικών φορέων του φάρυγγα για την ανάπτυξη διεισδυτικής λοίμωξης από K. kingae είναι χαμηλός (<1% ετησίως), ελλείψει κλινικής νόσου, δεν υπάρχει ένδειξη για την εξάλειψη του οργανισμού από τις αποικισμένες βλεννογονικές επιφάνειες. Παρ' όλα αυτά, στα αναφερόμενα κρούσματα λοιμώξεων από K. kingae σε παιδικούς σταθμούς, 31 από τους 199 (15,6%) συμμαθητές ανέπτυξαν αποδεδειγμένη ή υποτιθέμενη λοίμωξη, συμπεριλαμβανομένης θανατηφόρας ενδοκαρδίτιδας, εντός 1 μήνα, υποδεικνύοντας ότι τα αιτιολογικά στελέχη συνδύαζαν ασυνήθιστη μεταδοτικότητα και λοιμογόνο δράση. Υπό αυτές τις συνθήκες, έχει χρησιμοποιηθεί προφυλακτική αντιβιοτική θεραπεία για την εξάλειψη του αποικισμού σε επαφές και την πρόληψη περαιτέρω περιπτώσεων νόσου, η οποία αποτελείται είτε από ριφαμπικίνη μόνη της, 10 mg/kg ή 20 mg/kg δύο φορές την ημέρα για 2 ημέρες, είτε ριφαμπικίνη σε συνδυασμό με αμοξικιλλίνη (80 mg/kg/ημέρα) για 2 ημέρες ή 4 ημέρες.

Η αποτελεσματικότητα αυτών των θεραπευτικών σχημάτων κυμάνθηκε μεταξύ 47% και 80%, υποδεικνύοντας ότι η εξάλειψη της K. kingae από τους αποικισμένους βλεννογόνους είναι δύσκολο να επιτευχθεί.

Ωστόσο, μετά τη χορήγηση προφυλακτικής αγωγής με αντιβιοτικά, δεν έχουν ανιχνευθεί περαιτέρω κρούσματα νόσου, γεγονός που υποδηλώνει ότι η μείωση της βακτηριακής πυκνότητας από αντιβιοτικά ή/και η πρόκληση αποτελεσματικής ανοσολογικής απόκρισης μέσω παρατεταμένης μεταφοράς είναι αρκετή για να μειώσει τη μεταδοτικότητα και να αποτρέψει περαιτέρω κρούσματα